Probióticos para alívio do mau hálito

1. Introdução do produto

Nome do produto: Pó probiótico de sabor oral
Especificações do produto: 2g * 30 peças/caixa
Indicações: A composição da cepa fornecida por este produto pode inibir o crescimento das principais bactérias patogênicas que causam mau hálito e pode aliviar efetivamente os sintomas do mau hálito.
Forma de uso: 3 vezes ao dia, 1 comprimido de cada vez; recomenda-se tomar o pó seco por via oral logo após as refeições. Pessoas com mau hálito crônico precisam tomá-lo por muito tempo até que seu hálito fique fresco.
Método de conservação: Conservar em local fresco, de preferência refrigerado a 4 graus.
Contagem viável: Mistura probiótica (50 bilhões de UFC/g), Bacillus coagulans PB-BC 02 (20 bilhões de UFC/g) e Lactobacillus salivarius HH-LS 17 (30 bilhões de UFC/g).
Outros ingredientes: 200 mg de sorbitol, 200 mg de ácido cítrico, 200 mg de hortelã-pimenta em pó, 200 mg de vitamina C, 100 mg de frutooligossacarídeo, 200 mg de galactooligossacarídeos, 100 mg de sucralose, 100 mg de sabor alimentar.

2. Patogênese

A flora oral é um componente chave da barreira da mucosa oral e da resposta imunológica, que pode resistir à invasão de patógenos e prevenir e tratar doenças bucais. O desequilíbrio microecológico oral pode destruir a barreira mucosa oral e proporcionar condições para a colonização de bactérias produtoras de odor, causando assim doenças bucais como a halitose. A halitose oral (IOH) é responsável por 80% a 90% da halitose e é causada principalmente pela produção de compostos voláteis de enxofre por microrganismos orais. Fusobacterium nucleatum pode decompor substratos contendo enxofre na cavidade oral em compostos voláteis de enxofre. Compostos voláteis de enxofre (VSCs) e seus metabólitos também podem produzir substâncias como escatol, cadaverina, indol e putrescina, que podem causar mau odor oral.
Atualmente, os tratamentos convencionais para o mau hálito incluem principalmente a remoção mecânica (escovação dos dentes, raspagem da língua, etc.), terapia química (enxaguante bucal com clorexidina, goma de mascar, etc.) e o uso da medicina tradicional chinesa e produtos naturais (chá polifenóis , vitamina C, catequinas, etc.). e o uso de probióticos, etc. Os métodos tradicionais de tratamento têm efeitos de curto prazo, e o uso a longo prazo pode causar desequilíbrio da flora oral. Os probióticos podem regular a flora oral desde a raiz e inibir o crescimento de bactérias produtoras de odores. Portanto, o uso de probióticos para tratar a halitose tornou-se gradualmente um foco de pesquisa.

3. Mecanismo dos probióticos para melhorar o mau hálito

Tal como as doenças com causas microbianas, como a cárie dentária e a periodontite, o mau hálito pode ser tratado microbianamente, atacando as bactérias causadoras a ele associadas. Os probióticos podem inibir o crescimento de bactérias patogênicas orais, regular a flora oral e manter a saúde da microecologia oral. Os principais mecanismos pelos quais os probióticos atuam incluem os seguintes aspectos: (1) Competir por locais de ligação, reduzir a colonização de bactérias patogênicas e coagregar-se com bactérias patogênicas. ; (2) Competir por nutrientes e fatores de crescimento e produzir substâncias antibacterianas; (3) Aumentar a resposta imune do hospedeiro e inibir a produção de citocinas pró-inflamatórias induzidas por patógenos.

4. Probióticos da Hehe Biotech para melhorar o mau hálito

O número da cepa de Bacillus coagulans é PB-BC02 e o nome é Bacillus coagulans. Está depositado no Centro de Coleta de Cultura Tipo da China na Universidade de Wuhan em Wuhan, China. A data do depósito é 12 de dezembro de 2018. O número do depósito é CCTCC NO: M2018889.

5. Avaliação do efeito da melhora do mau hálito

Neste estudo, 5 cepas probióticas foram inicialmente selecionadas avaliando a capacidade dos probióticos de inibir a produção de H2S por Fusobacterium nucleatum, e ainda avaliada a capacidade de 5 cepas probióticas de inibir a produção de compostos de sulfeto voláteis (VSCs) e biofilme por Fusobacterium nucleatum. Bacillus coagulans PB-BC 02 e Lactobacillus salivarius HH-LS 17 foram duas cepas de probióticos com bons efeitos in vitro. Finalmente, foram comparadas as taxas inibitórias de probióticos de cepa única e probióticos compostos no crescimento de Fusobacterium nucleatum. Os resultados mostraram que o complexo O efeito inibitório dos probióticos no crescimento de Fusobacterium nucleatum é melhor do que o de bactérias isoladas, indicando que a combinação de Bacillus coagulans PB-BC 02 e Lactobacillus salivarius HH-LS 17 tem o efeito de melhorar o mau hálito . Os métodos de teste e resultados são os seguintes:

5.1 A capacidade dos probióticos de inibir a produção de H2S por Fusobacterium nucleatum

Princípio do teste: A reação de H2S e FeSO4 para produzir precipitado preto de sulfeto ferroso FeS é usada para avaliar a capacidade de diferentes probióticos de inibir a produção de H2S por Fusobacterium nucleatum.
Operação específica: Faça uma solução de sulfato ferroso e tiossulfato de sódio, filtre-a através de uma membrana de filtro estéril de {{0}} 0,22 μm e adicione-a ao meio de cultura BHI para fazer a concentração final de sulfato ferroso e tiossulfato de sódio 0 0,2‰ e tiossulfato 0,3‰. Em seguida, foi adicionado 2% de suspensão bacteriana de Fusobacterium nucleatum 109CFU/mL, seguido de solução bacteriana probiótica a 5% e cultivado anaerobicamente a 37 graus por 36 h.
Resultados do teste: Triagem baseada na quantidade de precipitação produzida. "-" significa sem precipitação, indicando que os probióticos têm forte capacidade inibitória contra Fusobacterium nucleatum. "+" tem pouca precipitação, "++" tem muita precipitação e "+++" há muitos sedimentos. Os resultados são mostrados na Tabela 1. Entre as 31 cepas probióticas, 11 cepas tiveram pouca precipitação, 8 cepas tiveram muita precipitação, 7 cepas tiveram grande quantidade de precipitação e 5 cepas (Lactobacillus acidophilus HH-LA26, Lactobacillus paracasei HH-LP58, Lactobacillus salivarius HH-LS17, Lactobacillus bifidum HH-BL18 e Bacillus coagulans PB-BC 02) não apresentaram precipitação, indicando seu potencial para melhorar a halitose.

Tabela 1 Capacidade de 31 cepas probióticas de inibir a produção de H2S por Fusobacterium nucleatum

5.2 A capacidade dos probióticos de inibir a produção de compostos voláteis de enxofre (VSCs) por Fusobacterium nucleatum

Método de teste: Cinco cepas de probióticos foram inicialmente selecionadas com base em sua capacidade de inibir a produção de H2S pelo Fusobacterium nucleatum, e os VSCs produzidos pelo Fusobacterium nucleatum foram posteriormente quantificados usando um instrumento Halimeter. Um total de 2 mL de suspensão bacteriana de Fusobacterium nucleatum a 107 UFC/mL e solução bacteriana probiótica a 15% (v/v) foram adicionados ao tubo de ensaio Hungate. Após co-cultura durante 9 horas, foi medida a capacidade dos probióticos de inibir a produção de Fusobacterium nucleatum. capacidades dos VSCs.
Resultados do teste: os VSCs são os principais culpados do mau hálito. Eles não apenas refletem o grau do mau hálito, mas também danificam o tecido gengival, o que é um indicador muito importante. Medindo a taxa inibitória das cinco cepas obtidas na triagem preliminar em VSCs produzidos por Fusobacterium nucleatum, as cepas foram posteriormente rastreadas. Os resultados são mostrados na Tabela 2. Entre eles, a capacidade inibitória de 3 cepas foi superior a 80% e a taxa inibitória de 2 cepas foi superior a 80%. Abaixo de 70%. Portanto, três cepas probióticas, incluindo Lactobacillus salivarius HH-LS17, Lactobacillus bifidus longum HH-BL18 e Bacillus coagulans PB-BC02, foram selecionadas para estudar seus efeitos na formação de biofilme de Fusobacterium nucleatum.

Tabela 2 Efeito dos probióticos na produção de VSCs por Fusobacterium nucleatum

5.3 A capacidade dos probióticos de inibir a formação de biofilme de Fusobacterium nucleatum

Método de teste: Ajuste a concentração bacteriana de Fusobacterium nucleatum para 107 UFC/mL e deixe repousar por 9 horas. Em seguida, adicione-o a uma placa de 96-poços. Adicione 180 μL de Fusobacterium agrega suspensão bacteriana e 20 μL de solução bacteriana probiótica a cada poço. 37 Cultivo em grau por 48 h. No grupo controle negativo foi adicionado o mesmo volume de meio MRS em vez do líquido probiótico, e no controle branco foi adicionado o mesmo volume de BHI em vez do líquido probiótico. Após a incubação, lave duas vezes com tampão PBS, depois fixe com metanol a 99% durante 15 min, descarte o sobrenadante e seque à temperatura ambiente. Após a conclusão da secagem, adicione 100 μL de solução de cristal violeta a 0,1% a cada poço, core por 5 minutos, lave duas vezes com água estéril após a coloração e coloque em temperatura ambiente até secar completamente. Finalmente, adicione 200 μL de solução de ácido acético a 33% para dissolução. Depois de misturar com uma pipeta, pipete 175 μL de cada poço e adicione-o a uma nova placa de 96-poços e leia o valor de absorbância a 570 nm com um leitor de microplacas. O método de cálculo da redução mediada por biofilme é a taxa de inibição (%)=(biofilme de controle negativo - quantidade de biofilme de intervenção sobrenadante) / biofilme de controle negativo.
Resultados dos testes: Bolsas periodontais e saburra lingual são fatores de risco para mau hálito porque fornecem um ambiente ideal para o crescimento de bactérias que produzem VSCs e outras moléculas de odor. Os microrganismos geralmente existem na forma de biofilmes nas bolsas periodontais e na saburra lingual. Fusobacterium nucleatum serve como uma bactéria ponte intermediária na formação da placa dentária. A formação do seu biofilme é a chave para causar mau hálito. Portanto, inibir o seu biofilme é um passo importante para aliviar o mau hálito. Possibilidades são fornecidas. O método de coloração violeta cristal foi utilizado para determinar a capacidade do Lactobacillus em inibir a formação de biofilme por Fusobacterium nucleatum. Os resultados são mostrados na Tabela 3. Quando foi adicionada solução bacteriana probiótica a 5%, Bacillus coagulans PB-BC 02 e Lactobacillus salivarius HH-LS 17 apresentam o melhor efeito de inibição, ultrapassando 35%. Com base nos resultados da inibição da produção de VSCs e biofilmes por Fusobacterium nucleatum, Bacillus coagulans PB-BC 02 e Lactobacillus salivarius HH-LS 17 apresentam melhores efeitos in vitro. A seguir, são avaliados seus efeitos no crescimento de Fusobacterium nucleatum.

Tabela 3 Efeitos inibitórios dos probióticos no biofilme de Fusobacterium nucleatum

5.4 Efeito dos probióticos no crescimento de Fusobacterium nucleatum

Método de teste: Adicione 190 μL de 107 UFC/mL de suspensão bacteriana de Fusobacterium nucleatum a cada poço de uma placa de 96-poços e, em seguida, adicione 10 μL de solução bacteriana probiótica, cultive anaerobicamente a 37 graus e monitore a 600 nm a cada 3 horas. Meça o valor de absorção e desenhe uma curva de crescimento.
Resultados dos testes: Muitas doenças bucais são causadas pelo desequilíbrio da flora oral. Uma certa capacidade antibacteriana ajuda os probióticos a regular a flora oral. Os resultados são mostrados na Figura 1. O efeito inibitório dos probióticos sobre Fusobacterium nucleatum está na ordem de probióticos compostos > Lactobacillus salivarius HH-LS 17 > Bacillus coagulans PB-BC 02 > grupo controle de meio MRS, indicando que ambas as cepas de probióticos são Pode inibir o crescimento do Fusobacterium nucleatum, e a combinação das duas cepas tem um melhor efeito inibitório sobre o Fusobacterium nucleatum.

Figura 1 Efeito dos probióticos no crescimento de Fusobacterium nucleatum

Em resumo, Bacillus coagulans PB-BC 02 e Lactobacillus salivarius HH-LS 17 podem inibir a produção de H2S, VSCs e biofilme por Fusobacterium nucleatum, e a capacidade de inibir o crescimento de Fusobacterium nucleatum após a composição é mais forte do que a de cepas únicas, indicando que a combinação de Bacillus coagulans PB-BC 02 e Lactobacillus salivarius HH-LS 17 pode melhorar o mau hálito.

referências:

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